fa بکارگیری تکثیر با پرایمر اختصاصی الل ، در تشخیص زیر گروههای سیستم خونی Rh در بیماران تالاسمی مدیریت خدمات بهداشتی درمانی Hospital Managment پژوهشی اصيل Original Research <strong>زمینه و هدف:</strong> تالاسمی یک بیماری ژنتیکی است که بصورت کمبود نسبی یا کامل زنجیره‌های آلفا یا بتا گلوبین می‌باشد. بیماران مبتلا در فرم متوسط و شدید خود از اوایل زندگی احتیاج به تزریق خونهای متعدد پیدا می‌کنند. وقوع آلوایمونیزاسیون در برابر آنتی ژنهای گروههای خونی در مبتلایان به تالاسمی نسبتا بالاست و ممکن است مشکلات زیادی را در درمانهای طولانی مدت و تزریقات بوجود بیاورد. بوجود آمدن آلوآنتی بادی ضد این گروههای خونی موجب پیدایش مشکلات عدیده منجمله آماده کردن خون سازگار برای تزریق می‌شود. لذا تعیین دقیق آنتی ژنهای گلبولهای قرمز این بیماران در کاهش آلوایمیونیزاسیون، امری ضروری بنظر می‌رسد.  <br><strong>روش بررسی:</strong> در این مطالعه، بصورت تصادفی از 40 نفر از بیماران تالاسمی، قبل از اقدام به تزریق خون، 4 سی سی خون محیطی در لوله های حاوی EDTA گرفته شد. همچنین از 10 نفر از افراد سالم که سابقه هیچ تزریق خون نداشتند هم بعنوان کنترل نتایج سرولوژیکی (آگلوتیناسیون) و مولکولی وارد مطالعه شدند. تعیین فنوتیپ بیماران و گروه کنترل بوسیله گلبولهای قرمز بیماران بروش آگلوتیناسون لوله‌ای طبق دستور بوسیله آنتی بادی های تجاری صورت گرفت. جهت انجام آزمایش مولکولی آزمون Allele Specific Oligonucleotide (ASO)PCR   برای هر یک از آنتی ژنهای مورد نظر در میکروتیوب های جداگانه انجام شد.<br><strong>یافته‌ها :</strong> در این مطالعه با استفاده از اللهای اختصاصی هر الل در شرایط دمایی یکسان  هر چهار ژن مورد بررسی تکثیر شد. بعلاوه مقایسه نتایج بدست آمده از دو روش مولکولی و آگلوتیناسیون نشان داد که در گروه شاهد که سابقه هیچگونه تزریق خونی را نداشتند، نتایج مشابهی در دو روش فوتیپی و ژنوتیپی دیده شد، اما در گروه بیماران نتیجه بر خلاف گروه شاهد بود و نتایج این دو روش در بسیاری از نمونه‌ها تفاوت داشت.<br><strong>بحث و نتیجه گیری:</strong> مزیت این روش نسبت به روشهای دیگر مثل PCR-RFLP  اینست که هر چهار ژن در یک شرایط دمایی و غلظت، قابلیت تکثیر را داشته و بلا فاصله با انجام الکتروفورز تعیین پروفایل آنتی ژنی فرد انجام می‌شود و از طرفی دیگر هزینه و زمان زیادی که در روش PCR-RFLP که در آن پس از تکثیر ژن، محصولات را در مدت خاصی تحت تاثیر آنزیم قرار می‌دهند را ندارد. لذا روش فوق  بعلت سادگی روش و ارزانی نسبت به سایر روشها به مراکز درمانی و تحقیقاتی پیشنهاد می‌گردد.</p> </span> <p style="text-align: justify"><strong>Background and Aim:</strong> Thalassemia is a genetic disease whit relative or complete lack of alpha or beta globin chain. Patients with moderate and severe form need to have multitransfusion in early life. Occurrence of all immunization against blood group antigens in patients with thalassemia is relatively high and may have difficulties in treatment and transfusion. Antibody production against this blood groups cause lots of problems like preparation of compatible blood for transfusion. Correct diagnosis of blood group phenotype due to existence of dual population of donor and patient RBC would be difficult. <br><strong></strong></p> <p style="text-align: justify"><strong>Materials and Methods:</strong> In this study, randomly from 40 thalassemic patients, before blood transfusion, 4cc of peripheral blood collected in tubes containing EDTA. Also, 10 healthy individuals who had no history of blood transfusion were in the study as control for serological (agglutination) and molecular results . Phenotyping of patients and control group was done by tube agglutination method by commercial antibody. For molecular test, Allele Specific Primer Amplification (ASPA) PCR was performed for each antigens in separate micro tubes. <br><strong></strong></p> <p style="text-align: justify"><strong>Results:</strong> In this study' we could set up a method that can amlify any of Rh C c E and E gene separately by a pair of specific primer in a same thermal conditions.Comparison of results of two methods showed that in the control group with no transfusion history. Similar results in phenotyping and genotyping was observed. But in patients, results of two methods had lots of differences. <br><strong></strong></p> <p style="text-align: justify"><strong>Discussion and Conclusion:</strong> The advantage of this method over PCR-RFLP method is that' all four genes can be amplified the in a same concentration and temperature conditions, and ability to determine the individual's antigen, immediately by electrophoresis. Therefore, Since the above method is simple and inexpensive for medical and research centers it is recommended.</p> آزمون ASO،PCR،آزمون RFLP،PCR،گروه خون Rh Rh Group System,ASO-PCR,PCR-RFLP 64 71 http://payavard.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-135&slc_lang=fa&sid=1 MT Hojati محمد طاهر حجتی No F Nabatchian فریبا نباتچیان Yes N Einohhahi ناهید عین الهی No A Pourfathollah علی پور فتح الله No MR Mahdavi محمدرضا مهدوی No